3.1液相方法

　　安捷伦C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相组成是水和甲醇，比例为57%水和43%甲醇，流速1.0毫升/分钟，进样量10微克。

　　3.2质谱方法

　　质谱条件扫描方式采用负离子多离子反应监测模式MRM电压-4500伏，离子源雾化温度300℃，雾化气82.7千帕，气帘气68.9千帕。京尼平苷酸分子量373.2，碎片分子量211.1，DP电压-77伏，CE电压-18.5伏，CXP电压-10伏。桃叶珊瑚苷分子量345.2，碎片分子量182.9，DP电压-49伏，CE电压-13伏，CXP电压-2伏。芍药苷分子量479.3，碎片分子量121.1，DP电压-60伏，CE电压-22伏，CXP电压-8伏。

　　4制备及标准曲线的绘制

　　4.1标准品的制备

　　称取一定量的京尼平苷酸[1]和桃叶珊瑚苷用甲醇溶解，配成浓度为1毫克/毫升的混合标准品标准液。称取一定量的芍药苷，用甲醇溶解，配成浓度为100纳克/毫升的标准液。用200微克的空白血浆、100毫升的芍药苷标准液、100毫升的混合标准品标准液（经稀释），混合后使得混合标准品的浓度分别为0.192，0.96，4.8，24，120，600，3000纳克/毫升。涡旋30秒后12000转/分离心10分钟取上清液。

　　4.2血样的制备

　　血浆样品制备血样于12000转/分离心10分钟后取血浆200微克，加入100毫升的混合标准品溶液，100毫升芍药苷，涡旋30秒，12000转/分离心10分钟，取上清液进行血浆中京尼平苷酸和桃叶珊瑚苷的LC-MS/MS测定。

　　4.3标准曲线的绘制

　　用内标法绘制京尼平苷算和桃叶珊瑚苷[2]的标准曲线，芍药苷为内标。

　　5大鼠给药

　　大鼠以每克体重给药1毫克的给药量进行口服给药，取血时间为0，0.5，1，1.5，2，2.5，3，3.5，4，5，6，8，10，12，24h。根据标准曲线测出血样中京尼平苷酸和桃叶珊瑚苷的含量，绘制药时曲线。

　　6实验结果

　　6.1标准曲线

　　图1京尼平苷酸标准曲线

　　根据测得京尼平苷酸和桃叶珊瑚苷和混合标准品也内标芍药苷相应的浓度及峰面积，绘制出相应标准曲线图1、图2。其中京尼平苷酸的标准曲线为y=2.041x+0.1482，R2=0.9999，桃叶珊瑚苷的标准曲线为y=7.9851x+0.5673，R2=0.9998。

　　图2桃叶珊瑚苷标准曲线