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1.2方法
1.2.1尿标本的收集及NAG的测定连续3d收集各组患者24h的尿液，将24h尿液混匀后取10mL，然后以1000r/min离心10min，取上清液2mL于-70℃冰箱中保存。采用矫正的双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA，上海吴昊生物有限公司）测定尿NAG的浓度，取3次结果的平均值。操作严格按照试剂盒说明进行，标本经盐酸和氢氧化钠预处理。为减少尿液稀释和浓缩对结果的影响，尿NAG以其与肌酐的比值表示。
1.2.2观察指标所有患者均常规检测血清胱抑素（Cys-C）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、血尿酸（UA）、血肌酐、糖化血红蛋白、尿肌酐等指标。
1.2.3尿微量白蛋白的测定连续3d收集患者的24h尿，将24h尿液混匀后取10mL，应用全自动免疫分析仪检测患者的尿微量白蛋白，取平均值，根据24h尿量计算UAE。
1.3统计学处理
采用SPSS16.0统计软件，计量资料以（x±s）表示，采用单因素方差分析判断多组间差异，采用独立样本t检验判断两样本间差异，计算Pearson相关系数判断两个变量的相关关系。
2结果
2.1各生化指标的比较
对照组及糖尿病组的体重、腰围、BMI、肌酐、性别、年龄均无统计学意义（P>0.05）。如表2所示，尿NAG与对照组相比明显升高，差异具有统计学意义（P<0.05）。尿NAG在正常蛋白尿组已升高，随着DN的加重逐渐升高，C组与B组、A组相比最高，差异均具有统计学意义：[Avs.C（P<0.01），Avs.B（P<0.01），Bvs.C（P<0.01）]。
与对照组比较，DM组的血清胱抑素C水平明显升高，具有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比，A组的血清胱抑素水平开始升高，并且随着DN的进展逐渐升高，均有统计学意义（P<0.05）。
与对照组比较，DM组CHO、UA水平均升高，差异有显著性（P<0.05）。DM各组比较，随着DN的发展CHO、UA水平逐渐升高，差异有显著性（P<0.05）。
尿蛋白定性结果：糖尿病组中，阴性171例，阳性81例，其中（+）36例，（++）30例，（++++）15例，阳性率32.1%；尿微量白蛋白升高171例，阳性率67.8%；尿NAG和血清胱抑素升高196例，阳性率77.8%；其中81例正常蛋白尿组中，2项均升高33例，检出率40.7%，单项增高分别45和42例，检出率55.6%和51.9%。
2.2相关分析
血尿酸、胱抑素、肌酐、CHO、尿NAG（u/gCr）与尿蛋白排泄量呈正相关（P<0.001，r值分别是0.357、0.602、0.434、0.285、0.344、0.303、0.863）。
3讨论NAG是一种高分子量糖蛋白，属于细胞内溶酶体酶之一，主要存在于肾近曲小管上皮细胞溶酶体中，正常时不能通过肾小球滤膜，平时尿液中少量的NAG是肾小管上皮细胞在胞吐过程中漏出的，而糖尿病患者在糖代谢紊乱时导致局部血流减少，血管内皮细胞缺血缺氧及高血糖对血管内皮细胞长期慢性损害，使血管内屏损伤，从而尿中的NAG含量会增加，其含量随肾小管上皮细胞的损伤程度增加，是肾小管间质损伤及评价肾功能的敏感指标。
Cys-C为122个氨基酸的低分子量（1.33JDa）的蛋白质，由肾小球分泌，由小管代谢而且已经被用作肾脏损害的预测指标，人体所有有核细胞都能持续产生Cys-C且相当恒定，可以影响肌酐的肾外因素对血清胱抑素C几乎没有影响，许多报道已经强调了它在糖尿病肾脏损害中的作用，其敏感性要高于血肌酐等，认为其是糖尿病肾功能不全早期诊断的指标。
结果显示，糖尿病患者的尿NAG和血Cys-C的水平都明显高于正常对照组（P均<0.01），相关性研究表明血Cys-C和尿NAG水平与UAE呈正相关关系（P<0.001），相关系数分别是0.602和0.863），即两者随着DN的发展逐渐升高，同时两者的升高在正常蛋白尿组就已经出现，这说明两者不仅参与了DN的发生发展，而且可能发生在DN的早期。
研究发现，尿NAG和血Cys-C与UAE相比在DN的诊断中有更高的阳性率，尿NAG和血Cys-C阳性率均是77.8%，UAE阳性率67.8%，在正常蛋白尿中2项均升高者33例，检出率40.7%，单项增高者分别有45和42例，检出率55.6%和51.9%，与其他指标相比有更高的敏感性，其与Mohammadi等[4]结果一致，所以我们认为测尿NAG和血Cys-C对于DN的早期诊断及评价肾功能损害非常有意义，可明显提高DN的诊断率，可将它们作为常规筛选指标。 |
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