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【摘要】目的 探讨水罗伞药材提取总黄酮的方法。方法 采用微波技术提取水罗伞中总黄酮,通过紫外分光光度法测定水罗伞中总黄酮的含量。结果 以水黄皮素为对照,在260 nm处测定其吸收度。水罗伞样品中总黄酮平均含量为1.12%,平均回收率为99.5%,RSD＝2.36%。结论 该法操作简便、可靠,可用于该药材总黄酮的提取。
【关键词】 水罗伞 微波技术 总黄酮 含量测定
微波具有穿透力强、选择性高、加热效率高等特点。微波辐射(MWI)可以大大加快反应速度(最高达1 240倍),缩短反应时间。微波技术的应用近年来得到很大发展。微波技术应用于植物细胞破壁,有效地提高了收率,取得了令人可喜的进展。我们首次运用微波技术辅助测定水罗伞(豆科植物干花豆Fordia cauliflora Hemsl.的干燥根)中总黄酮的含量,现报道如下。
1 材料
916型紫外可见分光光度计(澳大利亚GBC公司)；MAS-Ⅰ型常压微波反应器(上海新仪微波化学科技有限公司产品)。水黄皮素对照品：水黄皮素(3-甲氧基水黄皮素)从广西大新县产水罗伞中提取分离得到,经UV、IR确定结构,经RP-HPLC法测定并用峰面积归一化法计算含量为98.23%。水罗伞药材采自广西大新县,经鉴定为豆科植物干花豆Fordia cauliflora Hemsl.的干燥根。所用试剂均为分析纯,实验用水为重蒸水。
2 方法与结果
2.1 样品处理
水罗伞药材经粉碎后过65目筛,细粉于烘箱中60 ℃干燥4 h,待用。
2.2 标准曲线的制备
学术论文发表
精密称取水黄皮素对照品适量,加无水乙醇制成每1 mL含0.029 mg的溶液,作为对照品贮备液。精密量取以上对照品贮备液0.6、1.0、1.4、1.8、2.0 mL于5 mL量瓶中,加入无水乙醇稀释。进行全波长扫描,在260 nm处均有最大吸收。于260 nm波长处测定吸收度值(A),以吸收度值为纵坐标(A),溶液浓度为横坐标(C),得回归方程：A＝0.559 9C＋0.005 7, r＝0.999 6。水黄皮素在0.003 48～0.011 6 mg/mL处有良好的线性关系。
2.3 供试品溶液的制备
精密称取样品粉末2 g于烧瓶中,加入无水乙醇50 mL,将此烧瓶放入MAS-I型连续微波反应器中。反应温度80 ℃,反应时间30 min。滤过,取25 mL续滤液至50 mL量瓶中,加无水乙醇定容至刻度。
2.4 回收率试验
精密称取已知含量的水罗伞供试品,加入一定量的水黄皮素对照品,依法测定,平均回收率为99.5%,RSD＝1.28%。结果见表1。表1 回收率试验结果(略)
2.5 精密度试验
精密吸取供试品溶液5份,依上法测定吸收度。结果表明,本法具有良好的重现性(n＝5),RSD＝0.025%。
2.6 稳定性试验
吸取适量供试品溶液,依上法每隔1 h重复测定吸收度,结果表明,在5 h内测定吸收度无明显变化(n＝5),RSD＝0.038%。
2.7 样品含量测定
精密吸取供试品溶液0.5 mL置10 mL容量瓶中,按与标准曲线相同的方法测定。总黄酮平均百分含量为1.12%,RSD＝2.36%。结果见表2。表2 样品测定结果(略)
学术论文发表
3 讨论
微波能使植物细胞中的水分或有机溶剂迅速升温、升压,细胞壁穿孔,使成分从细胞中溶出。这与传统提取方法依靠细胞内外溶液的浓度差与渗透压差使药物成分透过细胞壁半透膜溶出的方式不同,因此微波的提取效率高。微波加热升温快,热在内部产生,是一种绿色清洁能源,与传统回流法相比,可节省大量能源及时间。采用微波技术提取法提取水罗伞中总黄酮含量(1.12%)与文献记载采用传统回流提取法提取的总黄酮含量(1.24%)相比,基本一致。
参考文献：
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[6] 李芙蓉,吕 博.葛根中总黄酮的微波提取及含量测定[J].新疆中医药, 2002,20(6)：9－10.学术论文发表
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